RPMI-1640細胞培養(yǎng)基RPMI-1640是Moore等人于1967年在美國紐約州法羅市的羅斯韋爾公園紀念研究所(RoswellParkMemorialInstitute,RPMI)開發(fā)出來的,RPMI是該研究所開發(fā)的一類細胞培養(yǎng)基,1640是培養(yǎng)基代號。RPMI-1640是改進型的McCoy‘s5A培養(yǎng)基,使用碳酸氫鹽緩沖系統(tǒng),與大多數(shù)哺乳動物細胞培養(yǎng)基不同的是其典型的PH8的配方。RPMI-1640培養(yǎng)基常初是為淋巴細胞培養(yǎng)專門設計的,現(xiàn)在已廣泛應用于各種正常細胞和ai細胞的培養(yǎng),包括HeLa細胞、Jurkat細胞、MCF-7細胞、PC12細胞、PBMC細胞、星形膠質(zhì)細胞和ai細胞,是使用常為廣的培養(yǎng)基之一。RPMIRPMI1640培養(yǎng)基相比其他培養(yǎng)基之所以具有獨特的效果,是因為其中含有還原劑谷胱甘肽和高濃度的維生素。RPMI1640培養(yǎng)基含有生物素、維生素B12以及PABA,這些成分是Eagle’sMEM和DMEM所不具備的。針對廣的細胞培養(yǎng)應用,我們提供多種組分的RPMI1640改良培養(yǎng)基。RPMI-1640細胞培養(yǎng)基L-谷氨酰胺(Glutamine)是細胞培養(yǎng)中所必需的一種營養(yǎng)元素,但其在溶液中不穩(wěn)定,會自發(fā)降解,不含L-谷氨酰胺的培養(yǎng)基,可以根據(jù)研究需要任意調(diào)整L-谷氨酰胺的用量,在使用時添加新鮮的L-谷氨酰胺或其替代物更利于細胞的生長。L-丙氨酰-L-谷氨酰胺。
Fischer’s培養(yǎng)基含有多類細胞培養(yǎng)所需的氨基酸、維生素、無機鹽等多種成分。河南細胞培養(yǎng)基供應商
Ham’sF-12營養(yǎng)混合物(Ham’sF-12NutrientMixture)Ham’sF-12營養(yǎng)混合物(Ham’sF-12NutrientMixture)是由Ham在1969年以Ham’sF-10營養(yǎng)混合物為基礎設計而成的,初用于CHO細胞的無血清培養(yǎng)。Ham’sF-12常作為無血清培養(yǎng)的基礎培養(yǎng)液,在低血清含量下時,特別適合單細胞培養(yǎng)和克隆化培養(yǎng),添加血清后也廣泛應用于細胞和原代細胞的培養(yǎng),如大鼠肝細胞、大鼠前列腺上皮細胞、軟骨細胞、大鼠成肌細胞、雞胚胎細胞等。此外,Ham’sF-12與DMEM等體積混合后,得到的DMEM/F12培養(yǎng)基營養(yǎng)更為豐富,使用更為較廣。Ham’sF-12營養(yǎng)混合物(Ham’sF-12NutrientMixture)L-谷氨酰胺(Glutamine)是細胞培養(yǎng)中所必需的一種營養(yǎng)元素,但其在溶液中不穩(wěn)定,會自發(fā)降解,不含L-谷氨酰胺的培養(yǎng)基,可以根據(jù)研究需要任意調(diào)整L-谷氨酰胺的用量,在使用時添加新鮮的L-谷氨酰胺或其替代物更利于細胞的生長。 貴州RPMI-1640細胞培養(yǎng)基廠家直銷Ham’s F-12營養(yǎng)混合物(Ham’s F-12 Nutrient Mixture)是由Ham以Ham’s F-10營養(yǎng)混合物為基礎設計而成的。
1.細胞培養(yǎng)基的種類按照細胞培養(yǎng)基的發(fā)展歷史,細胞培養(yǎng)基大致可分為平衡鹽溶液、天然細胞培養(yǎng)基、合成細胞培養(yǎng)基、無血清細胞培養(yǎng)基、限定化學成分細胞培養(yǎng)基等幾大種類。(balancedsaltsolution,BSS)BSS主要是由無機鹽、葡萄糖組成,它的作用是維持細胞滲透壓平衡,保持pH穩(wěn)定及提供簡單的營養(yǎng)。其主要用于細胞的漂洗、配制其他試劑等。幾種常用的BSS配方如下(表1-1)。D-Hank's與Hank's的一個主要區(qū)別是前者不含有Ca2+和Mg2+,因此D-Hank's常用于配制胰酶溶液。因為Ca2+、Mg2+是細胞膜的重要組成成份,參與細胞粘附等功能,使用不含Ca2+、Mg2+的BSS可避免細胞結團。此外,Hanks液和Earle液是常用的BSS基礎溶液,前者緩沖能力較弱,適合于密閉培養(yǎng);后者緩沖能力較強,適合于5%CO2的培養(yǎng)條件。天然培養(yǎng)基指來自動物體液或利用組織分離提取的一類培養(yǎng)基,如血漿、血清、雞胚浸出液等。其優(yōu)點是營養(yǎng)成分豐富,培養(yǎng)效果良好,但缺點是成分復雜,來源受限且制作過程復雜、批間差異大。目前使用的天然培養(yǎng)基是血清,另外各種組織提取液、促進細胞貼壁的膠原類物質(zhì)在培養(yǎng)某些特殊細胞也是必不可少。水解乳蛋白是乳白蛋白經(jīng)蛋白酶和肽酶水解的產(chǎn)物。
生物藥物生產(chǎn)過程中,DMEM 培養(yǎng)基扮演著關鍵角色。在單克隆抗體生產(chǎn)環(huán)節(jié),科研人員利用 DMEM 培養(yǎng)基培養(yǎng)雜交瘤細胞,使其大量增殖并分泌高純度的單克隆抗體。在疫苗生產(chǎn)方面,DMEM 培養(yǎng)基用于培養(yǎng)病毒抗原,如流感疫苗生產(chǎn)中,通過在 DMEM 培養(yǎng)基中培養(yǎng)流感病毒,獲取足夠的病毒抗原,進而制備出安全有效的流感疫苗。此外,一些重組蛋白藥物的生產(chǎn)也依賴 DMEM 培養(yǎng)基培養(yǎng)的細胞,這些細胞在培養(yǎng)基提供的營養(yǎng)環(huán)境下,高效表達出具有***價值的重組蛋白,為患者帶來希望。DMEM/F12培養(yǎng)基常作為開發(fā)無血清培養(yǎng)基的基礎,也適用于低血清含量下哺乳動物細胞的培養(yǎng)以及克隆密度培養(yǎng)。
病毒學研究領域,DMEM 培養(yǎng)基也是不可或缺的重要材料。它可用于培養(yǎng)病毒顆粒,為深入研究病毒的生命周期創(chuàng)造條件。在 DMEM 培養(yǎng)基構建的環(huán)境中,病毒宿主細胞,并完成吸附、侵入、復制、裝配和釋放等一系列生命活動??蒲腥藛T借此觀察病毒復制過程,了解病毒如何利用宿主細胞的物質(zhì)和能量進行自身繁殖,進而篩選出有效的抗病毒藥物。例如,在流感病毒研究中,利用 DMEM 培養(yǎng)基培養(yǎng)流感病毒,研究其變異規(guī)律及對不同藥物的敏感性,為流感防治提供有力支持。
RPMI-1640培養(yǎng)基初是為淋巴細胞培養(yǎng)專門設計的,現(xiàn)在已應用于各種正常細胞ai細胞的培養(yǎng)。甘肅醫(yī)用細胞培養(yǎng)基生產(chǎn)產(chǎn)家
基礎研究到生物生產(chǎn),DMEM/F12全程護航細胞健康生長。河南細胞培養(yǎng)基供應商
細胞培養(yǎng)基的種類很多,按其來源分為合成培養(yǎng)基和天然培養(yǎng)基(目前使用的培養(yǎng)基絕大部分是合成培養(yǎng)基),按其物質(zhì)狀態(tài)分為干粉培養(yǎng)基和液體培養(yǎng)基兩類。干粉培養(yǎng)基需由實驗者自己配制并滅菌,液體培養(yǎng)基由專業(yè)商家提供,用戶可直接使用,非常方便。1、合成培養(yǎng)基的主要成分有:氨基酸、碳水化合物、無機鹽、維生素及其它輔助物質(zhì):氨基酸氨基酸是組成蛋白質(zhì)的基本單位。不同種類的細胞對氨基酸的要求各異,但有幾種氨基酸細胞自身不能合成,必須依靠培養(yǎng)液提供,這幾種氨基酸稱為必需氨基酸。其中谷氨酰胺是細胞合成核酸和蛋白質(zhì)必需的氨基酸,在缺少谷氨酰胺時,細胞生長不良而死亡。因此,各種培養(yǎng)液中都有較大量的谷氨酰胺。但是,由于谷氨酰胺在溶液中很不穩(wěn)定,應置于-20℃冰箱中保存,在使用前加入培養(yǎng)液內(nèi)。已含谷氨酰胺的培養(yǎng)液在4℃冰箱中儲存2周以上時,還應重新加入原來量的谷氨酰胺。碳水化合物碳水化合物是細胞生長主要能量來源,其中有的是合成蛋白質(zhì)和核酸的成分。主要有葡萄糖、核糖、脫氧核糖和醋酸等。無機鹽培養(yǎng)液中無機鹽的主要功能是幫助細胞維持滲透壓平衡。此外,通過提供鈉,鉀和鈣離子,幫助細胞調(diào)節(jié)細胞膜功能。河南細胞培養(yǎng)基供應商
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