人類精子冷凍保存和儲存：增加了冷凍樣本的安全性、精液冷凍保存方案、快速液氮熏蒸冷凍、冷凍精液的解凍、玻璃化冷凍等內容，更具可操作性。本手冊對人類精子的冷凍保存提出了具體建議：將樣本分管分罐分開儲存；對使用的材料和留存標本建立定期核驗程序；所有儲罐都應有液位監(jiān)控報警系統(tǒng)，以監(jiān)測溫度和液氮液位，傳感器應連接警報器，可通過實驗室人員的終端進行提醒。新證據表明，玻璃化冷凍是冷凍保存精液的一種有價值的方法。該方法的原理是將小體積樣本與無污染液氮直接接觸并快速冷凍，可以防止冰晶的形成，并減少精子的滲透性損傷。在麥管玻璃化冷凍(無菌玻璃化冷凍)中，也可以使用封閉系統(tǒng)，不需要無菌的液氮。IVOS已成為快速、準確、穩(wěn)定可靠的進行精子分析的代名詞。香港人精子分析VCL

CASA可將每個精子的活力按以下分級：（1）前向運動型（PR）：精子運動活躍、線性運動或者在較大的范圍內運動。（2）非前向運動型（NP）：所有其他非前向運動的形式，如精子在較小的范圍內運動，精子頭部輕微移位或只觀察到尾部擺動。（3）完全不動型（IM）：精子完全不動。CASA系統(tǒng)檢測的這些參數有一套標準的術語。（1）VCL=曲線速度（mm/s）。精子頭沿其實際的曲線，即在顯微鏡下見到的二維方式運動軌跡的平均速度。檢測細胞活力。（2）VSL=直線速度（mm/s）。根據精子頭在開始檢測時的位置與***所處位置之間的直線運動的時間平均速度。（3）VAP=平均路徑速度（mm/s）。精子頭沿其空間平均軌跡移動的時間平均速度。（4）ALH=精子頭側擺幅度（mm）。精子頭沿其空間平均軌跡側擺的幅度。以側擺的最大值或平均數值表示。（5）LIN=直線性。曲線軌跡的直線性。即VSL/VCL。（6）WOB=擺動性。精子頭沿其實際軌跡的空間平均路徑擺動的尺度。即VAP/VCL。（7）STR=前向性。空間平均路徑的直線性。即VSL/VAP。（8）BCF=鞭打頻率（Hz）。精子曲線軌跡越過其平均路徑軌跡的時間平均速率。（9）MAD=平均移動角度（度）。精子頭沿其曲線軌跡瞬間轉折角度的時間平均***值。廣州前向運動精子分析DSL在男科和輔助生殖技術領域，精子質量的評估是診斷和處理的重要環(huán)節(jié)。

CASA系統(tǒng)也可用于精子形態(tài)學評估。CASA系統(tǒng)可用來定量分析精子頭部形態(tài)學、中段甚至主段的形態(tài)，可以把精子頭部和中段分類為正?；蛘卟徽?，還可以給出頭部和中段尺度、頭部橢圓率和勻稱性的均數、標準差和中位數，以及對染色的精子頂體區(qū)進行測量[3]。與人工操作相比，自動化系統(tǒng)更具客觀性，精確度和重復性的潛力[4]。精確度和重復性不低于7%[5]，這優(yōu)于有經驗的技術人員的手工評估。兩個研究已經提示在CASA結果與生育力之間存在***聯系。Coetzee等發(fā)現自動分析的正常精子形態(tài)的結果是預示體外受精率和妊娠率的有意義指標[6]。Garrett等發(fā)現**中能與透明帶結合的、具有某些頭部形態(tài)特征的精子所占的百分比（Z%），和直線速度（VSL）的精子的百分比，與大樣本的低生育力夫婦的自然妊娠率是有***且**的關系。Z%和VSL與生育力間的關系顯示是連續(xù)的，而且沒有顯示臨界值；高于臨界值，妊娠率也不會進一步增加[7]。

醫(yī)生為了鑒定男性生育能力，常囑男方作精液檢查，正常精液顏色為灰白色或乳白色。如節(jié)欲時間長者，可呈淡黃色，若出現鮮紅色.暗紅色，則提示患者有炎癥或生殖道損傷。每次排精量為2~6毫升，常受排精次數與頻率的影響。新鮮精液呈稠厚膠凍狀，1小時之內應液化為稀薄的液體，用一根小玻璃棒插入精液中再提起，所形成的精液絲長度一般不超過2厘米，否則視為異常。精液呈弱堿性，PH值為7.2~7.8。正常精子數應超過2000萬/毫升。排精后1小時內活動精＞=50%。世界衛(wèi)生組織推薦精子活動力分為四級：0級：不活動；1級：精子原地擺動；2級：有中等的前向運動；3級：前向運動活躍，快速直線運動。正常的精子活動力為2~3級的精子＞=40%~50%.精子形態(tài)：畸形精子小于50%。分析男性生育能力不能單從精液的一項指標定論，應對精子數量活力活動率液化時間畸形率等多方面進行綜合能力分析。采集精液前5～7天內必須停止性生活，并且不得有**、夢遺等情況，還應禁煙戒酒，忌服對生精功能有影響的藥物等。WHO第6版明確提出：使用CASA系統(tǒng)須遵循適當的程序步驟，才能獲得可靠和可重復的結果。

七、精子形態(tài)檢查[正常參考值]畸形精子：＜10%-15%；凝集精子：＜10%；未成熟精細胞：＜1%。[臨床意義]1．精索靜脈曲張病人的畸形精子增多，提示精子在不成熟時已進入精液，或靜脈回流不暢造成陰囊內溫度過高和睪丸組織缺氧，或血液帶有毒性代謝產物從腎或腎上腺靜脈逆流至睪丸，上述原因均有損于精子形態(tài)。2.精液中凝集精子增多，提示生殖道***或免疫功能異常。3.睪丸曲細精管生精功能受到藥物或其他因素影響或傷害時，精液中可出現較多病理性未成熟精細胞。八、精液細胞檢查[正常參考值]白細胞(WBC)：＜5個/HP(高倍鏡視野)；紅細胞(RBC)：0-偶見/HP。[臨床意義]1．精液中白細胞增多，常見于精囊炎、前列腺炎及結核等。2．精液中紅細胞增多，常見于精囊結核、前列腺*等。3.精液中若查到*細胞，對生殖系*有診斷意義。CASA系統(tǒng)操作簡便，檢測速度快，且重復性優(yōu)于人工檢測。南京慢速運動精子分析負相差

CASA系統(tǒng)主要用于精子動力學的分析，可以評估精子的濃度、活力等參數。香港人精子分析VCL

九、精液酸堿度(pH)檢查[正常參考值]7.2-8.0。[臨床意義]1．精液pH值＜7.0，多見于少精或無精癥，常反映輸精管道阻塞、先天性精囊缺如或附睪病變等。2．精液pH值＞8.0，常見于急性***，如精囊炎、前列腺炎等。十、男性生育力指數測定[計算公式]I=M(N×V)/（A×106）式中I為男性生育力指數；M為活動精子百分率；N為每毫升的精子數；V為精子運動的速度；A為畸形精子的百分率。[正常參考值]正常人生育力指數＞l。[臨床意義]1．生育指數為0，表明完全無生育能力。2．生育指數為0-1之間，表明有不同程度的生育障礙。香港人精子分析VCL